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            【收藏】160個理化檢測常用實用經驗匯總,看到你就賺到了!

            放大字體  縮小字體 發布日期:2022-11-28  瀏覽次數:188
            核心提示: 1、 檢驗一些不易溶解的樣品時,采用超聲波超聲可使樣品溶解更快速更徹底,主成分溶解完全,沒有浪費,對含量均勻度測定沒
             1、 檢驗一些不易溶解的樣品時,采用超聲波超聲可使樣品溶解更快速更徹底,主成分溶解完全,沒有浪費,對含量均勻度測定沒有影響,且簡單方便且更合理。



            2、乙醇作為溶劑溶解主成分時,不能溶解輔料,需要過濾。采用離心方法使輔料沉淀,取上清夜。(注意,有很多離心管不具塞子,可用柔軟的塑料薄膜袋扎橡皮筋做塞子。沒有塞子離心,偏差可達5%),與薄膜過濾法比較,對測定結果沒有影響。而且,如果過濾法操作不夠快速,乙醇揮發,易影響測定結果。



            3、在做浸出物的檢測時,一定要按標準控制好溶劑的濃度(如乙醇等),否則檢驗結果會差異很大。



            4、當液相鑒別中供試品與對照品出峰時間不一致,無法判斷是否合格時,可用對照品與供試品各半配成混合溶液后進樣,若峰寬未變寬,未出現駝峰,即可判斷為合格。



            5、做原料殘留物檢測的時候,如果主成分對雜質有干擾,現有方法無法檢出,需要自己建方法的話,要優先考慮利用理化性質將雜質分離出來再進行測定。往往有意想不到的效果。



            6、用薄層色譜法鑒別時應該考慮展開劑的溫度與配制順序,有時會影響色譜的結果。



            7、薄層色譜鑒別時飽和時間一定要夠。做有機溶劑殘留量檢查時,可以不拘泥于規定的色譜柱, 通常的DB-624可以滿足要求, 取樣量也可以靈活調整, 標準溶液濃度根據限度做相應調整就可以了。



            8、在采用HPLC法測物質含量時,如若流動相中用了緩沖鹽,一定要注意其pH值,放置過程中可能會產生變化,而某些檢測成分對這種變化很敏感。



            10、用HPLC法測物質含量時,溫度的控制極其重要,最好用有柱溫箱的,如果沒有就要裝空調保持恒溫后再測定,否則會出現基線飄移,結果不準確。



            11、在使用微量移液槍時,要注意"重壓輕打",加液會更準確。



            12、提取分液時如兩相的分界不清,可加少量的飽和氯化鈉。分層處會比較明顯。另外,用電吹風對分液漏斗加溫或用熱抹布敷,可以加速其分層。



            13、呋喃唑酮溶解很慢,溶解時間一定要長一點。



            14、用HPLC法測物質含量時,樣品最好用流動相溶解,否則容易產生干擾峰,影響結果,特別有可能出現倒峰,一定要注意。



            15、使用含有緩沖鹽的流動相,容易堵塞管路和柱子,甚至檢測器,如果檢測器堵了,最好先不要拆,使用10%甲醇水超聲加熱一下作為流動相,慢慢小流量沖洗。效果很明顯。



            16、非水滴定中,試劑的含水量對結果有較大影響,如更換不同品牌的試劑,試驗結果會出現不同結果。



            17、比較稠或量少的溶液需要用濾紙過濾時,可以先通過離心的方法使之分層,再去過濾。這樣可以加快過濾,減少有機溶劑的揮發(環境溫度高時)。



            18、用高效液相色譜儀檢測人參、麻黃的含量時因檢測波長為邊緣波長(203、207nm)往往一次不能成功,特別是使用一段時間后的檢測器?尚兜羯V柱,直接連接檢測器,用0.1%的鹽酸清洗檢測池4小時,效果會好些。



            19、用高效液相色譜儀測定含量時,用色譜純試劑處理對照品和樣品,可減少誤差。



            20、HPLC檢測中,梯度條件容易產生干擾峰,可嘗試通過以下幾種方法規避:

            1):使用重蒸后的水或用市售的純凈水(屈臣氏的比較好)

            2):盡量選用高波長下檢測

            3):梯度程序盡量平緩

            4):樣品濃度選用線性范圍內的最高點



            21、在作澄明度檢查、可見異物或者不溶性微粒檢查時,不可以用超聲波助溶,否則有些東西就被分解了,什么也檢測不到了。



            22、在做溶出度實驗時,規定藥液需經0.8μm的濾膜濾過,但采用液相檢測時,進柱前樣品還要經0.45μm的濾膜,此時,可以省略第一步過濾,直接做進柱前的樣品過濾,否則濾膜會對樣品產生吸附,使檢測結果偏低。另外不同生產廠家的濾膜對樣品的吸附不同,在檢測時一定要要注意,可用對照品先做一個過濾前后的對比試驗,檢查濾膜的吸附。



            23、在做有機溶劑殘留市要注意載氣流速一般柱流速在1—3mL較好,太大樣品重復性不好,尾吹氣流量也需注意。



            24、在檢驗純化水硝酸鹽項目時一定要冰浴,加硫酸的速度也要控制不能快(快了會使對照和樣品的顏色都很深)也不能太慢(不能讓試液冷卻),要趁熱拿去水浴加熱。



            25、使用HPLC的過濾裝置時 ,一定要注意慮膜的材質,如果是“羥甲基纖維素”不可以過濾含有機相的液體,否則就溶解了,有機相過濾要使用聚四氟乙烯的。



            26、在做不溶性微粒的時候是可以進行超聲的,可以進行30秒的超聲。特別是象凍干粉針這樣的品種,進行超聲或者放置可以使不溶性微粒的數值減小,大家可以實驗一下,放置后數據明顯降低。



            27、高效液相色譜梯度洗脫時,使用梯度條件情況下,在做第一針樣品前,最好走一個空梯度,這樣保留時間會一致些。



            28、分析鹽酸金剛烷胺片含量時,加溶劑后最好在50℃的水浴中加熱溶解,因為金剛烷胺溶解度受溫度影響。



            29、在做實驗前,要對你做的實驗的安全性,實驗中可能會出現的問題,做到心中有數特別是對具有危險性的實驗,更要做好一切準備,像防火,防爆炸等;瘜W實驗畢竟是有危險的,要時時注意特別要規范操作 在沒有弄明白之前,最好不要輕易動手。



            30、一個同事用燒瓶提取樣品時加了塞,并特意未將塞子蓋緊,以為可以放氣,結果由于無法放氣導致爆沸,里面的藥液全部沖到天花板上,還好旁邊沒人哦。所以做實驗室且不可大意,還是小心謹慎為好。



            31、用薄層層析法時,很多樣品因為含有羧基或者氨基會造成跑板拖尾現象或者重疊,這將難以和標準品比對。建議大家在含羧基的樣品中可在展開劑里面加少量羧酸,含氨基的樣品可以在展開劑里面加少量三乙胺。



            32、做油性基質提取時,由于受溫度影響嚴重,常出現乳化現象,分層時間長,可上離心機只要幾分鐘。



            33、有人誤將濃硝酸(在空氣中有“發煙”現象)作為“發煙硝酸”使用,進行硝化-氫氧化鉀呈色鑒別反應,結果不能得到正確的顏色反應,造成假陰性結果。該呈色反應的機理為利用樣品的水解產物莨菪酸,經發煙硝酸加熱硝化為三硝基衍生物,在氫氧化鉀的醇溶液中形成醌型化合物而呈色!鞍l煙硝酸”是指含HNO3達86-97.5%以上的濃硝酸。而“濃硝酸”雖有"發煙"現象,但其HNO3僅為69%-71%,用于上述呈色反應,會因為硝酸濃度不足而使反應不完全,形成假陰性結果。



            34、一般的鹽溶解,可采用超聲波加快溶解速度。尤其對一些需要加熱再冷卻的樣品!



            35、做薄層鑒別方法研究時,有時候對照品斑點與樣品相應斑點位置不一致,可以在樣品點上加點對照品,注意點圓心要重合等,在相同方法展開,如果在相應位置上沒有出現兩個斑點,則認為是同樣的物質斑點。



            36、在用HPLC做定量檢測時,柱溫和流動相的比例要盡量保持一致,否則保留時間和積分面積會發生變化,影響最終的檢測結果。



            37、超聲溶解難溶鹽類,可加快溶解速度。特別對一些不適合加熱的樣品。



            38、看到美國藥典的對照品干燥通常規定具體時間3到5小時,我們也應該采用這種方法而不是干燥到恒重。



            39、做薄層分析時,最好將薄層板兩邊的硅膠層切掉2mm,這樣,在展開時可以消除邊緣效應,使展開效果更好。



            40、在做HPLC時,假如發生重疊峰的現象,通?梢試L試以下幾種方法:

            1)、改變流動相成分,如乙腈相改為甲醇相;

            2)、調整流動相比例;

            3)、調整流動相pH值;

            4)、梯度洗脫。



            41、做含量測定時,若對照品規定干燥時,一定要照規定方法干燥,否則測出的含量會差別很大,若沒規定干燥時,參照2005年版凡例應用五氧化二磷干燥,否則測出的含量也會差別很大,別認為是剛買的就忽視這一點,隨便試幾個對照品就知道了,結果差很多的。



            42、高濃度的NaOH標準溶液(比如0.5M)在使用過程中,桶底的部分往往會濃度變高,一般十升的溶液,最下面的一升就不能用了,否則會給滴定結果帶來很大的偏差,尤其是夏天。



            43、標定標準溶液時,最好使用兩個廠家的基準試劑同時標定三個樣。



            44、當液相鑒別中樣品與對照品出峰時間不一致,無法判斷是否合格時,可用對照品與樣品各半配成混合溶液后進樣,若峰寬未變寬,未出現駝峰,即可判斷為合格。



            45、用HPLC法測定酚酸等不穩定成分時,可將對照品溶液及供試品溶液調成酸性(可用磷酸等),這樣即不會影響測定結果,而且樣品也比較穩定,保存時間比較長,pH值一般調到2左右即可!



            46、在進行HPLC測定時,所用的水最好是雙蒸水,這樣對測定結果干擾少,而且要勤換,如果通道生霉,可用異丙醇沖洗通道。有機相如已腈最好濾一下,即使是進口色譜純溶劑。



            47、做微生物檢測時,我曾經遇到過一件事,發現移液管中有干熱滅菌法殺滅不了的細菌,我們對微生物檢查的各個環節做了對照,才發現的,后來就改用一次性注射器了,雖然浪費了點,但是這種現象再也沒有發生過。



            48、做紅霉素片釋放度時,酸度對釋放度的影響不小,能差5~7個百分點,要及時更換硫酸,否則可能會影響釋放度結果。



            49、曾經做過一次微生物檢查的驗證,細菌一般培養48小時,霉菌72小時,其實在細菌20個小時,霉菌40個小時左右的結果和最終的結果很相近的,如果不是在邊緣,完全可以在很著急的情況下下結論。



            50、采用薄層法進行檢測時,可在展開前在展開室四周用略低于展開室高度的濾紙貼在內壁,使展開劑充分預飽和,這樣可取得較好的展開效果。



            51、做格列吡嗪片含量時對照品不容易溶解,可在溶劑里面少加一點0.1mol的氫氧化鈉溶液使對照品溶解后再定溶。



            52、高效液相色譜柱的維護:

            1)使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度);

            2)大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍;

            3)避免流動相組成及極性的劇烈變化;

            4)流動相使用前必須經脫氣和過濾處理;

            5)如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中;

            6)氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。



            53、獻丑一下吧。

            1)萃取過程產生的乳化,在乳化不是太嚴重情況下將分液漏斗水平放置桌上。比用熱布包裹的效果好和快。

            2)上面已經有人提過,這里重復一下。只有藥品性質穩定,可以將振搖工作交給超聲儀器超聲。即舒服、測定效果又好。如果藥品性質不是很穩定,可以將其放在恒溫振蕩儀中。不設溫度就好了,加上浴蓋又避光、搖得又均勻。

            3)清洗移液管等細長玻璃器具,沖洗要反其道進行。將尖頭對著水柱清洗,省力很多。



            54、萃取過程產生的乳化,在乳化不是太嚴重情況下將分液漏斗水平放置在水浴鍋的孔上,用水蒸汽加熱也是有效果的。



            55、做紅氧化鐵含量測定時一定要用鹽酸煮沸幾分鐘,不能因為危險而隨便在水浴上加熱,這樣會使含測結果超過100%。



            56、作萃取時如產生乳化,可加入相應的鹽類。



            57、在做分析方法驗證時,鑒別項的專屬性一般都很強,像紅外、紫外等,可不做專屬性,但是注意顯色反應的空白溶液,要保證溶液本身不顯色。



            58、用HPLC法測物質含量時,更換流動相時應先用10%的甲醇過渡10分鐘,這樣可避免在兩種流動相相溶時產生小氣泡。



            59、如果做過三硅三酸鎂的檢測,是否會遇到這樣一個問題:重金屬檢測時按照標準進行到最后,得到的樣品呈現紅色,與對照品的顏色(黃棕色)無法進行對照。其主要原是因為在此標準中加入酚酞調節溶液的酸堿度,最后一步加入硫代已酰胺試液后,溶液顯堿性,使酚酞顯紅色。解決的方法是在最后加入鹽酸進稍微多加一點,使溶液顯酸性,最終使對照與樣品顏色一致。



            60、用GC測有機殘留水不溶性成分時,如苯、二氯甲烷等,稱取毫克級標樣時,在量瓶底部預先加少量DMF/DMSO,會減少天平的跳動,幫助準確稱量。



            61、按2005版藥典含量稱樣量必須嚴格控制在0.1g或以下,若稱樣量高氧化不完全會影響結果,使結果偏低。



            62、在做比色法測定環氧乙烷殘留時。若加入品紅后等待1h后不見比色管(實驗中加入已二醇體積>0.8ml的比色管)呈微紅色,則證明實驗中所使用的高碘酸失效,需重新配置高碘酸。



            63、在做HPLC實驗中,如果經常做同一品種,流動相固定的情況下(不含有緩沖鹽),在做完試驗后可以用流動相直接沖柱子,不用甲醇或純化水沖,直接可以明日繼續使用。



            64、在含量測定過程中,如果遇到測量結果不準時如何處理?根據我的經驗在測量過程中可以帶標準樣品(已知含量)和被測試樣品同時、平行進行測試。把測試結果和標準樣品進行比較即可。這樣的話,我們測試的結果就可以得到修正了。如已知含量的標準樣濃度為1.0,而我們測試結果為0.91,我們就需要把樣品的測試結果除以0.91即可得到相對準確的結果。采用“加標回收”的方法更好。只是相對復雜一些。



            65、HPLC測含量時流動相若是乙腈,乙腈最好是新打開的,使用放置時間過長的乙腈容易導致檢測不出主峰。



            66、在做培養基的靈敏度實驗的時候,同時做試驗菌幾個稀釋級的試管,并同時取菌液計數.培養結束后,取菌液計數在小于100的培養結果做為測試結果,可以一次性將培養基的靈敏度測試出來,免除了當菌液計數結果不在要求范圍時培養基的靈敏度測試結果作廢,同時減少了實驗誤差。



            67、生孢梭菌計數采用流體硫乙醇酸鹽培養基(含瓊脂),稱取培養基15g,再加入純化瓊脂粉0.4~0.5g加入500ml蒸餾水后加熱使溶解后分裝至30*200的大試管中,50ml/管,加塞,包扎后滅菌,培養基溫度保持在45~50攝氏度時,將稀釋好的生孢梭菌菌液用吸管吸取1ml加入至培養基中,輕輕搖勻后置30~35攝氏度培養16~20小時,立即觀察點計菌數,切記培養期間不可搖動試管,生長的微生物群體在培養基中分散成小米狀,注意選擇菌數在30~50之間的試管,便于點計。



            68、在含量測定中如果使用到含結晶水的無機鹽作為對照品時,一定要注意不能按標準規定的”在五氧化二磷減壓干燥器中干燥12個小時以上",那樣會失去結晶水,造成結果偏低。此類對照品的保存環境一定要注意,不要引起吸潮現象。



            69、在溶解培養基時,如用電爐,要專人負責看管,否則培養基融化后會沖上天花板,并且石棉網會徹底報廢的。



            70、檢測純化水硝酸鹽時要緩緩滴加硫酸且在冰浴中不斷搖均使其放熱均勻,能使試驗結果明顯。



            71、在用HPLC測定肝蘇膠囊的含量時,其鹽酸的濃度相當重要,濃度一定要夠才行。



            72、在做HPLC時,最好一次把流動相配足,如果先配的流動相不夠,再用相同的方法去配的流動相繼續用,會出現保留時間不一致。其次,在發現流動相不夠時,最好不要把流出來的"廢液"再收集起來繼續用,這樣出來的峰面積會增大的。



            73、采用蒽酮法測核糖含量時,蒽酮要現用現配,棕色瓶裝,稀釋硫酸應于30-40度時加入蒽酮液中混勻。標準葡萄糖于60度干燥2小時配制。



            74、在用HPLC進行分析時,環境的溫度,對基線的影響很大,八月份前后,我們的HPLC的基線一直走不穩,究其原因是我們開了空調,室內溫度波動比較大,后來我們將HPLC放到一個面積小一點的房間,沒有再出現此類情況。



            75、對于HPLC做梯度時,如果用到水,那么水的質量對基線的影響很大,水越好,基線越平穩,建議使用屈臣氏水和杭州產娃哈哈水。



            76、做HPLC時,方法不要隨意變更。前一段時間,我們有一產品,本來用乙腈溶解,峰形不好。一化驗員把它改成用流動相溶解,峰形很好,但是樣品分解了,主成分只有70%左右,最后才發現,這樣品用流動相溶解很不穩定,降解很快,放十幾小時后,主成分就沒有了。



            77、說一下做抗生素的一點體會,有時市售的培養基瓊脂量加的不一樣,一般是加多了會導致藥液到了培養時間不能下完,可以在配制時適當多加一點水。另外培養基的pH值對抑菌圈的影響很大,一定要測一下pH值。



            78、做抗生素加藥時采用的毛細滴管尖頭容易碰斷,采用注射器去掉玻璃塞,把后面的手柄部分用銼刀去掉在酒精噴燈上圓口,做一個喇叭口,前面買7號平頭針頭或者把7 號針頭銼平,用著很方便,并且加液比原來更能準確把握。



            79、在用天平稱樣的過程中,如果跳穩定性很差,各方面的因素都排除以后還是不能解決,不妨考慮是否是因為靜電的影響。解決辦法是把稱量盤等在金屬上靠一下,導掉靜電。



            80、做熾灼殘渣是要控制好溫度,不要讓樣品燃燒,不然溶液噴濺,數據就不準了。



            81、天平不穩,和相對濕度關系也非常大。放一杯硅膠在里頭,穩定半小時。當然樣品含揮發性的東東太多,天平也會跳舞。



            82、在用高氯酸滴定藥品含量的時候,如果實驗室條件有限,實驗室的環境溫度與滴定液的標定時的溫度相差較大的時候,可以用電爐在通風櫥旁邊的地上加熱,這樣可以適當提高實驗的環境溫度,而又不會使溫度過高,使實驗結果更加精確。



            83、有些對照品溶解性很低,配制時最好不要采用稀釋法,而要采用一次配制法并且最好加熱或者超聲處理,例如槐角堿、橙皮苷等。



            84、用氨試液萃取水飽和正丁醇提取的三七類皂苷類成分時極易乳化,可在50度左右加熱促進分層,效果非常好。



            85、用氨試液萃取水飽和正丁醇提取的三七類皂苷類成分時極易乳化,可在50度左右加熱促進分層,效果非常好。



            86、 在做含量測定時,對照品的稱量很小,會有很大的誤差,能否將其稱量增大從而減小分析誤差。



            87、看了大家這么多好的經驗,受益匪淺,我也提兩個小經驗:

            1)硫酸鹽測定中,要求調pH值的,一定要用酸度計精密測定,不要用試紙,否則會影響結果;

            2)重金屬和砷鹽檢項中,標準溶液取用量最好是2ml,可以適當的調節供試品的取樣量,因為這個濃度顏色比較清晰,容易判斷;

            3)做氮含量測定采用常量法時,40%氫氧化鈉的使用量在90ml,比較好,反應比較完全;

            4)黃芪的含量一般是標準規定含量的10倍左右,所以,在制備供試品時,可以適當放大稀釋倍數;

            5)紅花中山萘酚含量測定時,制備供試品時,在水浴上蒸干,要控制好水浴的溫度,過高容易把樣品蒸干,造成結果不平行。



            88、各項檢驗中一定要進行細節分析才能確保結果的準確可,沒有細致的,認真的工作作風不能成為一個好的化驗員。



            89、在做樣品鑒別用分液漏斗萃取時,有時半天或一天都不能完全分層的話,可以把分液漏斗放進冰箱試試,若還不行,可以放一點氯化鈉。



            90、當索氏提取器與冷凝管以及相關類似需要用涂抹凡士連接其封密性的,如果凡士林涂抹過多以致干結而不能取下時,不妨考慮下先用溫水滋潤下,然后用超聲波清洗器超下,你會發現驚奇的效果。



            91、微生物限度方法驗證時,先做金黃色葡萄球的驗證,這個菌很敏感。先確定這個菌的驗證方法后,大腸和枯草就直接用金葡的方法做驗證,而不需要又先用常規法。黑曲和白念驗證時,先確定白念的方法,這樣可以減少勞動量。



            92、做卡爾費休水分測定時,要注意周圍環境中的濕度,如果濕度很大,預滴定的時間就會加長,而且有時就很難使漂移直達到穩定,無法進行水分檢測。



            93、做溶出度測定時,如果溶出液中有機溶劑用量較大,要注意水系濾膜的吸附作用,使用有機濾膜則沒有吸附作用。



            94、做液相時,如果峰形不好,壓力過高?刹捎酶淖兞鲃酉啾壤蜕咧錅囟葋斫鉀Q。



            95、如果需要將檢品灰化,此時高溫爐已壞,把坩堝放在電爐上也最多能炭化,怎么辦呢?我采用的是蒸發皿放在電爐上,可以達到灰化的效果。結果誤差雖然有點大,但可以應急,根據情況做出判斷。



            96、色譜柱使用一段時間后會出現柱頭塌陷,造成雙頭峰,可用同種牌號的填料將塌陷填平整,即可恢復分離效果,節約檢驗費用。



            97、在做原料要磷酸酯的澄清度的時候,最好一邊溶解一邊加樣品,或者一加溶劑就馬上攪拌,否則很難溶解。



            98、按照標準在進行氫氧化鈉的鋁鹽與鐵鹽的檢查時,濾渣用水洗凈這一步非常重要,如清洗不干凈容易造成結果超標。建議用硝酸銀溶液測定以下流出液的氯離子濃度,判斷濾渣是否洗凈。



            99、一個實驗室必備技巧:只要你手頭有已知的濃度的酒精(濃度為A%),你手邊還有一個量筒,那么你可以隨時配制低于A%濃度的任何一種濃度的酒精(濃度為B%)就是量取B毫升的A%的酒精,在量筒中稀釋到A毫升。明白了嗎?

            比方說配制70%的酒精可以用下列方法配置:

            1)取70mL100%的酒精稀釋到100mL得到70%的酒精。

            2)取70mL 95%的酒精稀釋到 95mL得到70%的酒精。

            3)取70mL 75%的酒精稀釋到 75mL得到70%的酒精。



            100、檢驗鹽酸麻黃堿鑒別時,使用無水乙醚不能鑒別顯色不明顯,將無水乙醚用水飽和后可解決。



            101、純化水硝酸鹽檢驗硝酸鹽全部可溶于水,所以溶液中硝酸根不與其他陽離子反應,硝酸鹽大量存在于自然界中,主要來源是固氮菌固氮形成,或在閃電的高溫下空氣中的氮氣與氧氣直接化合成氮氧化物,溶于雨水形成硝酸,在與地面的礦物反應生成硝酸鹽。一般,排向低處河流的廢水越多硝酸鹽的濃度也越高。農田施氮肥和有機肥,通過滲透,將增加地下水的硝酸鹽濃度。如果原水檢驗超標說明你們企業所處的地理環境的地下水資源已經污染到不利于生產的程度了!

            建議:

            1)送檢原水;

            2)檢查純化水制造設備;

            3)驗證硝酸鹽檢驗方法(試劑配制及冰浴和加溫的過程)。



            102、在酸性或堿性條件下做的反應,如果可能的話,產品后處理的時候,盡量中和一下。否則,產品放久之后可能會分解。



            103、請注意午間或夜間電壓、水壓的變化。親身經歷,之前曾做過一段時間的三甲苯的硝化反應,用的是濃硫酸和發煙硝酸,雖然是嚴格按照操作規程,且在加完硝化試劑讓其繼續加熱攪拌趨于平穩后,我才離開實驗室去吃中飯,但等吃完飯回去一看,通風櫥內一片狼籍:里面的硝化物和酸全部被沖了出來,回流冷凝管也被折在了實驗臺上,所幸的是沒有人受傷害。這其中的罪魁禍首是不穩定的電壓:在中午時段關閉了許多儀器,使局部電壓增高,導致加熱裝置在達到設定溫度后還有一段后延,結果才釀成了這樣的結果。所以,提請大家注意中午和夜晚電壓的變化是否會對你的實驗帶來影響。此外,在夜晚進行回流反應時也請注意水壓的變化,以前我也碰到過這樣的情況,容易造成橡皮管沖出而漏水。在用旋轉蒸發儀蒸除溶劑時,一定要等壓力穩定,溶劑蒸出時,人才能離開。特別是在蒸除象二氯甲烷這樣的低沸點溶劑時,一定要注意保護,否則,終產物掉入水中,那才是欲哭無淚啊。



            104、HPLC流動相中有乙腈的,時間長了不宜使用,因為乙腈水解生成乙酸,對部分品種的保留時間和峰形會有影響,另外非常經典的色譜條件突然不出峰或保留時間差許多,應該考慮下流動相是否混勻。



            105、用安捷倫1100高效液相時,如果標準是用100%甲醇溶解的話,一定要稀釋,一般用50%的甲醇,否則就拖尾。記住啊,100%的準確啊。



            106、新霉素鑒別項顏色反應稱樣量要用萬分之一天平,否則做不出來。



            107、用液相色譜法測含量時,跑基線的時間一定要足夠長,有時基線雖在短時間內平了,但色譜柱還沒有充分飽和,導致在用了柱溫箱的情況下,出峰的保留時間也會有很大差異!



            108、進行HPLC檢測使用磷酸鹽緩沖液:乙腈做緩沖液時時,當緩沖液比例小于50%時,由于混合過程是吸熱反應,在該過程中磷酸鹽會析出晶體,造成流動相混濁而報廢。如強行使用會阻塞色譜管道,對于這種情況,可以有以下兩種處理方法,一時首先配制50:50的溶劑,然后10%加入,超聲至高于室溫,在加入10%,再超聲高于室溫,直至到達所需比例。另一種是首先配制不帶鹽的流動相,再超聲至高于室溫后,加入固體鹽,超聲至溶解,再過濾。



            109、在清洗容量瓶和移液管時,最好用洗液清洗常用的是重鉻酸鉀和硫酸配比的洗液;在洗滌劑清洗不干凈時,可用一些回收的乙醇進行超聲。



            110、在做試驗之前,一定要檢查盛裝樣品的小瓶或蒸發皿等容器沒有裂紋及完好無損,本人有好幾次深受其害。



            111、做TLC時,發現一個問題在同一層析缸中先后放入兩塊板,結果后放的那塊邊緣效應幾乎沒有,結果提示我可以在層析缸中字上而下放入一張濾紙浸入展開劑中待全部浸濕再放入薄層板,目的就是使缸中更好的飽和,避免產生邊緣效應。



            112、檢驗雜質時,如果流動相用的是緩沖鹽類的,要定期沖洗液相系統,保證雜質的檢驗準確度。



            113、因濾膜對樣品中主成份的吸附,造成結果不穩定,在使用濾膜過濾前先用濾膜過濾對照品,與未經濾膜過濾的對照品進行對照,確定影響大小,然后再有的放失的使用。



            114、HPLC應用醋酸水溶液作流動相時要注意作完后要長時間沖洗柱子,否則會堵住。



            115、色譜峰出現肩峰不能用時,可以把色譜柱頭打開

            1)刮掉表面黃色或褐色的填料,用新的同樣的填料填補一下;

            2)把過濾頭用6N的硝酸超聲30分鐘,用純水超至中性;

            3)安裝柱子,就可以重新使用了。



            116、在做HPLC的梯度洗脫檢驗時,除了柱溫、流動相的pH值、兩相比例的比例外,進樣時的柱壓也是影響出峰時間和形狀的一個重要因素,所以進樣前流動相的比例、運行時間及進樣時的壓力要盡量保持一致,才能使試驗的重復性符合要求。



            117、在做溶出度試驗(轉籃法)時,碰到含量處于合格邊緣時,要特別慎重.因為水中含有一定量的氣體,尤其在37攝氏度左右時,轉籃的周圍會聚集大量的氣泡而影響藥物的釋放,因此含量會偏低。因此,用超聲或煮沸等方法除去水等溶劑中的氣泡后,含量會有一定的升高。



            118、在進行氯化物檢測時,如果使用濾紙過濾,一定要先用稀硝酸處理后在過濾樣品,否則會對結果產生很大影響。



            119、儀器分析中所用的試劑質量很關鍵,我們做抗生素的聚合物含量時,經常在聚合物出峰的時間也出現倒峰,查找了所有儀器和溶劑,最后確定是一個化學試劑廠生產的磷酸二氫鈉的原因。



            120、做薄層色譜,需要用碘蒸氣熏蒸時,需要注意溫度,冬天一般溫度比較低,最好能給她放到烘箱加熱一下。



            121、在使用一些易揮發性的試劑(如甲醇\乙醇或三氯甲烷)作溶劑時,操作動作要迅速,否則測量結果會比真實值偏高。



            122、HPLC如果流動相有緩沖鹽時,更換流動相時務必先將緩沖鹽更換掉,否則會將堵塞色譜柱。



            123、也談HPLC受溫度的影響:我們的HPLC配置還是可以的,帶柱溫箱,不過環境溫度對機器本身也是有很大影響的。做肽圖時機器一開就是兩三天,有一次夏天晚上實驗室的中央空調停了,結果機器也罷工了。



            124、再談談分子篩色譜柱的使用:一般而言分子篩色譜柱不如反相色譜柱的壽命長,有時維護不好做上兩百多個樣品就不行了,所以每次使用完一定要充分地用超純水把鹽沖洗干凈,并且用0.05%的疊氮鈉保存,一般沖洗兩小時就可以了。曾經我們也低速沖洗過夜的,后來發現可能是水對硅醇基的影響反而降低了柱子的壽命,就改了?梢栽谲浖显O置自動關泵,就不用人一直看著啦。



            125、做HPLC時,樣品稀釋好后是需要過濾的,最好選用與生產使用的同等材質的濾膜,這樣就不會產生偏差了。



            126、做液相自己經常容易犯的錯誤:

            1) 排氣泡不徹底,柱子沖了半天都難以平衡;

            2)更換流動相后,瓶子的體積忘記修改,結果不是進氣泡就是中途強制停止運行;

            3)走序列時,忘記勾選shut down,以致到了早上滿堂紅;

            4)緩沖液的pH一定要調節準確,否則對RT很有影響的。



            127、薄層色譜鑒別時,可以將展開劑放在雙槽層析缸的一邊,然后把點好的板子放在雙槽的另一邊飽和半小時候,然后再放在展開劑的一邊展開,這樣跑出來的點比較圓。



            128、在一般的過濾溶液時,如果不好過濾,建議將溶液離心后用上清液過濾,也可以用抽濾,這樣不會影響測定結果,也不浪費時間。



            129、用HPLC法測物質有關物質時,樣品放置的時間以及放置的溫度極其重要,所以最好現用現配,或者配好的樣品液一定要低溫保存,條件允許的話可以加一個自動上樣控溫裝置,這樣可防止雜質的降解,保證結果準確度。



            130、做HPLC時大多數都可以在泵頭和管路連接處發現有白色的結晶出現。產生這種結晶的原因是使用了含緩沖鹽的流動相后,對系統沖洗時間不夠,管路中殘留了少量的緩沖鹽隨流動相滲出造成的。如果有朋友發現相同的問題,只要延長沖洗時間就可以解決。



            131、在做薄層時層析缸的氣密性也很重要,新的層析缸最好在缸口涂點凡士林。做滴定時一定要注意所配溶液是否和以前的溶液的性狀相同(如:顏色),如果不同就要考慮試劑、溶劑和器皿是不是變質或被污染了。



            132、做紫外時因重視儀器的預熱時間,預熱時間太短,對實驗結果的影響很大。



            133、我看到有很多實驗員在配置薄層板的CMC-Na溶液時喜歡加熱,使其快速完全的溶解。這樣做有一個很大的弊端,制作出來的薄層板是非常不平滑的,建議還是讓其自己慢慢溶解,即時不能完全溶解,也可以使用。



            134、島津的HPLC-10A的部分儀器對乙腈非常敏感,如果流動相中含有大量的乙腈時因逐步過度,否則會產生漏液或壓力不穩定。



            135、做HPLC時使用低波長時,水的純度要求要比高波長要高一些。比如210nm以下波長檢測時。



            136、 進行TOC測定的時候,環境因素是影響測定結果最大的因素。

            1)取樣的瓶必須是干凈的,就是洗好的瓶子,必須遠離空氣中有機試劑濃度較大的房間,如果不能避免,就應當放置在相對密閉的柜子里;

            2)在樣品的轉移過程中,選擇空氣質量好的房間,若在配置過程中,房間里有有機試劑的存在,檢驗結果絕對不是樣品真實的值。

            做薄層的時候,如果用的不是預置板,建議最好把邊上的部分刮去,防止邊緣效應,對定量的結果會有很大的幫助。



            137、HPLC中流動相中加了三乙胺可以減小拖尾,關鍵是pH值。



            138、用液相測含量時,因每次配制的流動相有差異,按標準配制的流動相,有時峰分不開,可以適當調整比例,改善效果。



            139、抗生素的效價測定時加菌量一定要準確 否則結果會相差很大 不建議使用10ml的刻度吸管2.無菌實驗時,HTY601集菌儀使用之前先觀察集菌培養器的軟管走勢是否順暢,這時不宜使用太小的轉數,因為很容易擠斷軟管,大約在70轉數即可。



            140、0.05M磷酸氫二鈉250毫升與250毫升乙腈互溶后有白色絮狀沉淀,后超聲逐漸溶解變澄清。



            141、做氫氧化鈉的氯化物檢查時,先要將其用稀硝酸調節PH,否則結果很不準確!



            142、在使用全自動電子天平時,尤其是十萬分之一的天平,很容易發生讀數飄移。在稱量過程中,注意關好門窗,確保稱量環境的安靜,在天平的不需加樣的一側用一本厚重的文件夾擋住,會有利于維護環境的穩定。



            143、做馬來酸氯苯那敏的有關物質的時候,采用氣相法,樣品的溶劑峰旁邊會出來一個大峰,此峰在對照品中并無出現,容易疑惑是雜質并判斷為超標,實際此峰是馬來酸的峰,即馬來酸氯苯那敏進樣后會分解成馬來酸與氯苯那敏兩個峰。在做判斷時不止應扣除溶劑峰,還應扣除馬來酸峰。這樣才是真正結果。



            144、若離心的方法損失有效成分較多,則可以選擇冷置一夜,可以節省能源呵。



            145、綠原酸對照品的溶液很不穩定,最好現配現用。



            146、在做液相時候,如果保留時間不一致,看看室內溫度變化情況,還有就是你要是手動進樣時,進樣速度也有關系!



            147、我們在做不同廠家同一原料藥的熔點時發現該原料藥的熔點均不符合規定,在查找原因時,我們發現是介質硅油的原因。因為在測定熔點前看到介質硅油很臟了,里面有很多黑色浮游物,我們用棉花對其進行了過濾,硅油是清了,但測出的熔點數據錯了。換了新的硅油,熔點正常。



            148、做液相時如果流動相有緩沖鹽,一定要注意你的色譜柱的沖洗。不然峰的分離度不好。



            149、以前取清膏都是用滅菌后的錐形瓶,現在直接有用移液管抽取10mL到配制滅菌好的緩沖液中,菌檢結果還很好,免得清膏黏糊黏糊的難得清洗。



            150、做快速水分法時,連續測定樣品,須等溫度降下來后再加樣,否則在加樣過程中受熱水分蒸發造成結果偏低。



            151、檢測硫酸阿米卡星的硫酸鹽,要求在紫色開始消失的時候加50mL乙醇,可是開始消失的點不好判斷,一般是在加了5mL多EDTA滴定液之后就加乙醇,滴定結果一般消耗7-8mL,加的太晚有時候很難出終點。



            152、點樣之前先將薄層板活化一下,能夠使結果更加優化,我通常放在烘箱里烤5分鐘,再取出放冷。另外,展開劑應盡量精確,尤其是比例比較接近的是放在110℃烘箱烘30min,我覺得不應該等到放冷,立馬就可以點樣,原因:

            1)剛活化的板溫度高,散熱快;

            2)放冷的過程種很容易吸潮。



            153、做HPLC的時候,要是流動相中含有鹽晶離子,那沖柱子的時候一定要有水先沖一次(水:蒸餾水超升的),再用30%的甲醇沖洗,最后用甲醇沖洗。



            154、在測比重的時候,溫度對結果的影響很大,以前不是很注意,現在基本上都放在20攝氏度的水浴鍋中一段時間再測。



            155、做紫外的過程中,要注意石英比色皿,如果不干凈的話,也千萬不能用超聲來清洗,可以用甲醇和稀硝酸的混合液來浸泡,并且用時要認準石英比色皿兩個光滑面(保證光從有S的一個光潔面入射)。



            156、做HPLC的時候,走空白時,發現不停的有雜質峰出現,用流動相無法沖洗干凈,可能是進樣器,可能是泵,可能是柱子被污染了,可以用色譜級的異丙醇沖洗系統24h以上。



            157、我本人現在雖然不做分析員了,但從事了4年的檢驗工作,在此與大家分享一下我的個人經驗吧。檢測結果的準確性于很多因素有關:

            1)檢測環境包括濕度、溫度,特別是儀器分析。所以儀器分析室要有中央空調,HLPC最好配置溫控;

            2)樣品稱量。天平是否在適宜的溫度、濕度,稱量范圍是否校驗過;稱量過程是否規范;對于吸濕性樣品稱樣速度要快;

            3)樣品的處理:所用溶劑要按規定的配置且在有效期內、移液管潔靜、使用規范。當然,樣品處理是很重要的,液需要經驗值.不同產品性質不同,處理也不一樣。



            158、我覺得,在做抑菌實驗時,最好不要圖方便,老是先把小濾紙片貼到培養基上,再用精密移液器量取幾微升試樣滴于濾紙片上。因為要是移取試液的量很少很少時還勉強可以,如果稍大時,由于小濾紙片吸收液體的量很容易達到飽和,那么余下的試液就會往紙片四周沖散開來,,那就導致了抑菌圈變大,結果也就失去可信性了。最好是把紙片浸于試液中,取出晾干后再貼在培養基上。



            159、做薄層展開的時候,特別是中藥的品種,一定要注意溫度的變化!比如人參就得再10度一下才能分開。再就是預飽和,這個環節也很重要!



            160、有些溶劑在分層中很容易乳化,建議大家不要用力搖晃,如果是鑒別就顛倒著輕輕晃就可以了,如果已經乳化了建議用熱風吹效果好。如果是含量測定乳化后建議冷凍效果要比熱風吹好。如非必要不要加多余的東西,結果會有影響。



            文章(文字)來源:網絡。
            編輯:songjiajie2010

             
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